Tecniche di morte cellulare: Manuale di laboratorio

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Titolo originale:

Cell Death Techniques: A Laboratory Manual

Contenuto del libro:

La morte cellulare regolata, che è coinvolta in quasi tutti gli aspetti dello sviluppo e della fisiologia animale, può essere difficile da studiare in laboratorio. Esistono diversi tipi di morte cellulare, possono essere attivate diverse vie di segnalazione interconnesse e le conseguenze post mortem possono variare. Pertanto, spesso è necessaria una combinazione di tecniche specializzate per caratterizzare e confermare la morte cellulare nel sistema di interesse.

Questo manuale di laboratorio fornisce una serie completa di protocolli passo-passo per indurre, rilevare, visualizzare, caratterizzare e quantificare la morte cellulare in una varietà di sistemi. Gli autori descrivono le strategie per identificare e valutare i cambiamenti biochimici e morfologici che si verificano durante l'apoptosi, l'autofagia, la necrosi e altre forme di morte cellulare, nonché per individuare i geni e le proteine che possono essere coinvolti. I protocolli utilizzano la citometria a flusso, l'imaging e la microscopia, l'RNAi, il western blotting, le misurazioni dell'attività enzimatica e altri strumenti per valutare fenomeni quali la frammentazione del DNA, la permeabilizzazione della membrana lisosomiale, il flusso autofagico, la formazione di apoptosomi o ripoptosomi, l'attivazione delle caspasi e il rilascio del citocromo c. Le tecniche sono descritte sia per sistemi in vitro che per modelli in vivo, compresi topi, C. elegans e Drosophila.

Gli autori forniscono inoltre indicazioni sull'interpretazione e la presentazione dei risultati degli esperimenti di morte cellulare, nonché consigli sulle procedure complementari che possono essere necessarie per confermare i risultati di un determinato esperimento. Questa indispensabile risorsa di laboratorio consentirà a tutti i biologi cellulari e dello sviluppo, a partire dal livello universitario, di eseguire e comprendere con sicurezza un'ampia gamma di saggi di vitalità cellulare.