Tecniche del calcio: Manuale di laboratorio

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Titolo originale:

Calcium Techniques: A Laboratory Manual

Contenuto del libro:

La vita inizia con un'ondata di ioni calcio (Ca2+) al momento della fecondazione e, in seguito, la segnalazione del Ca2+ influenza quasi tutti gli aspetti dello sviluppo e della fisiologia dei mammiferi, dall'espressione genica e dalla proliferazione cellulare alla contrazione muscolare e agli impulsi nervosi. Per creare segnali di Ca2+ distinti spazio-temporalmente, le cellule utilizzano una varietà di meccanismi per riconoscere, trasportare e tamponare il Ca2+. Pertanto, per studiare il movimento del Ca2+ e i vari effettori coinvolti è necessaria una vasta gamma di tecniche sperimentali affidabili.

Questo manuale di laboratorio fornisce protocolli passo-passo per lo studio di molti aspetti della segnalazione del Ca2+, oltre a informazioni di base sui principi e sulle applicazioni delle tecniche. I collaboratori illustrano come utilizzare sonde di Ca2+ fluorescenti, luminescenti e geneticamente codificate in combinazione con modalità di imaging all'avanguardia per caratterizzare i segnali di Ca2+. Vengono descritte le misure elettrofisiologiche dell'attività dei canali del Ca2+, i dosaggi del flusso di Ca2+ radioattivo e i metodi per studiare la segnalazione mediata da specifici messaggeri che mobilitano il Ca2+ (IP3, cADPR e NAADP). Vengono inoltre fornite tecniche per modulare e sopprimere i segnali intra- e intercellulari. Ogni protocollo è completo di un elenco dei materiali necessari, di ricette dettagliate per i mezzi e i reagenti e di consigli per la risoluzione dei problemi.

Capitoli specifici sono dedicati alle tecniche di segnalazione del Ca2+ in sistemi non mammiferi, come piante, lievito, zebrafish e Xenopus. Sono inclusi anche metodi per valutare la cinetica di legame del Ca2+ e strategie per sviluppare modelli matematici di segnalazione del Ca2+. Questo manuale è quindi una risorsa di laboratorio completa per biochimici, biologi cellulari e dello sviluppo e fisiologi che utilizzano o vogliono ampliare il loro repertorio di tecniche sul Ca2+.