Biotest in farmacologia sperimentale e preclinica

Titolo originale:

Bioassays in Experimental and Preclinical Pharmacology

Contenuto del libro:

1.Panoramica

2.Saggi di coltura cellulare

2. 1 Saggio del ciclo cellulare: Marcatura con ioduro di propidio.

2. 2. Saggio di apoptosi: Marcatura con annessina V/ioduro di propidio.

2. 3 Citotossicità in cellule Caco-2 con il metodo del blu di Alamar.

2. 4 Vitalità in cellule Caco-2 stimolate con lipopolisaccaride (LPS).

2. 5 Determinazione dell'ossido nitrico (NO) mediante esperimento in vitro.

2. 6 Analisi della citotossicità specifica contro le cellule RAW 264. 7 per la determinazione dell'attività antinfiammatoria in vitro.

2. 7 Graffio di cellule di fibroblasti (scratch assay).

2. 8 Valutazione della risposta infiammatoria in vitro in cellule AGS.

3.Analisi fitochimica.

3. 1 Saggi fitochimici preliminari.

3. 2 Analisi quantitativa dei metaboliti secondari.

3. 3 Analisi cromatografica su strato sottile.

3. 4 Analisi mediante cromatografia liquida ad alte prestazioni (HPLC).

3. 5 Spettrometria di massa.

3. 6 Analisi in spettrometria di massa a ionizzazione elettrospray (ESI-MS).

3. 7 Identificazione dei composti fenolici mediante HPLC-LC-ESI- MS/MS.

3. 8 Determinazione quantitativa del contenuto di alcaloidi totali mediante HPLC.

3. 9 Determinazione quantitativa del contenuto di alcaloidi totali mediante HPLC.

4. Calcolo della dose di farmaco preclinico.

4. 1 Conversione basata sulla normalizzazione della dose alla superficie corporea.

4. 2 Determinazione della dose equivalente animale.

5.Studi di tossicologia (in vitro e in vivo)

5. 1 Valutazione della citotossicità mediante blu di Alamar.

5. 2 Test del micronucleo.

5. 3 Test della cometa.

5. 4 Effetto sul ciclo cellulare.

5. 5. Studio di tossicità acuta in vivo.

5. 6 Tossicità subcronica (dosi ripetute).

6.Procedura standard per l'anestesia negli esperimenti preclinici.

6. 1 Pianificazione e assistenza anestetica.

6. 2 Pre-procedura.

6. 3 Procedura sperimentale.

7.Considerazioni generali e raccolta del sangue animale.

7. 1 Raccolta di sangue in vena.

7. 2 Prelievo di sangue dalla vena caudale.

7. 3 Prelievo di sangue da puntura cardiaca.

7. 4 Vena cava posteriore.

7. 5 Seno orbitale.

8. Sperimentazione animale sul sistema cardiovascolare.

8. 1 Ottenere i segnali dell'elettrocardiogramma (ECG) e della pressione arteriosa (BP).

8. 2 Induzione dell'ischemia miocardica.

9.Esperimenti sugli animali con colite ulcerosa

9. 1 Colite ulcerosa indotta da acido 2,4,6-trinitrobenzensolfonico (TNBS).

9. 2 Colite ulcerosa cronica indotta da destrano sodio solfato (SSD) 2%.

9. 3 Colite con recidiva (cronica)

10.Esperimenti sulle attività antibatteriche

10. 1 Attività antibatterica mediante saggi in vitro.

10. 2 Sperimentazioni animali sull'attività antibatterica.

11.Sperimentazioni sulle attività antifungine

11. 1 Metodo di diffusione su disco di Agar.

11. 2 Concentrazione minima inibitoria (MIC)

11. 3 Test del sorbitale.

11. 4 Test su Neurospora crassa.

11. 5 Effetto dell'ergosterolo sulla MIC.

11. 6 Test di Β.

1,3-D-Glucano Sintasi (GS)

11. 7.